Hello小伙伴大家好，想必大家實(shí)驗(yàn)室都有蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）吧，對(duì)于脂類(lèi)、糖類(lèi)、氨基酸、聚合物等無(wú)紫外響應(yīng)的待測(cè)物我們還是得選擇通用型檢測(cè)器，今天小編匯總了一篇ELSD干貨，助力你的進(jìn)階之路，記得收藏&分享噢。

ELSD可作為高效液相色譜、高速逆流色譜、超臨界流體色譜等色譜的檢測(cè)器。作為新型的通用型檢測(cè)器，它具有許多優(yōu)點(diǎn)：首先，ELSD檢測(cè)不依賴于樣品的光學(xué)性質(zhì)，只要揮發(fā)性小于流動(dòng)相的物質(zhì)，都可以在ELSD上產(chǎn)生響應(yīng)。其次，ELSD可以很好的支持梯度洗脫，蒸發(fā)光散射檢測(cè)可以消除流動(dòng)相配比變化對(duì)基線產(chǎn)生的影響。另外，輔助載氣提高了檢測(cè)靈敏度，保持檢測(cè)池內(nèi)的清潔，避免污染。

但是，相對(duì)于UV檢測(cè)器，ELSD檢測(cè)也有一定的特殊性。ELSD檢測(cè)要求流動(dòng)相及流動(dòng)相中加入的修飾劑必須有良好的揮發(fā)性，這樣就使非揮發(fā)性的緩沖鹽的應(yīng)用受到了限制。與UV檢測(cè)器相比，ELSD檢測(cè)的靈敏度略低。

操作條件的選擇，選擇合適的操作條件可提高方法的靈敏度，操作條件的選擇取決于樣品的揮發(fā)性、流動(dòng)相的組成及其流速。

流動(dòng)相組成及流速的選擇，流動(dòng)相的揮發(fā)性越好，方法的靈敏度越高。流動(dòng)相的流速越低，相應(yīng)的信號(hào)越強(qiáng)。漂移管溫度對(duì)基線水平和噪音的影響并無(wú)明顯的規(guī)律性。更優(yōu)溫度應(yīng)為在流動(dòng)相基本揮發(fā)的基礎(chǔ)上，產(chǎn)生可接受噪音的更低溫度。載氣流速是影響檢測(cè)性能的一個(gè)很重要的因素。更優(yōu)載氣流速應(yīng)是在可接受噪音的基礎(chǔ)上，產(chǎn)生更大檢測(cè)響應(yīng)值時(shí)的更低流速。

溫度太低，基線水平較高，流動(dòng)相得不到充分揮發(fā)；溫度太高，會(huì)使流動(dòng)相沸騰，反而增加背景噪聲，同時(shí)還有可能導(dǎo)致被測(cè)樣品的部分揮發(fā)，降低信噪比。更優(yōu)的溫度應(yīng)為流動(dòng)相基本揮發(fā)基礎(chǔ)上，產(chǎn)生可接受噪音的更低溫度。

ELSD5450屬于低溫性蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，可以用低于溶劑沸點(diǎn)的溫度揮發(fā)溶劑。例如：純水的沸點(diǎn)為100度，調(diào)節(jié)揮發(fā)溫度為40度就可以達(dá)到水完全揮發(fā)的效果，如果是甲醇，溫度35度就可達(dá)到。所以日常實(shí)驗(yàn)中的梯度流動(dòng)相，多種溶劑混合后的沸點(diǎn)是低于100度的，我們把溫度設(shè)置在40度就可以了。不是說(shuō)溫度設(shè)置在60度80度就不可以，而是40度是它更佳的一個(gè)揮發(fā)溫度，揮發(fā)溫度越低樣品形成的顆粒越大，ELSD的響應(yīng)值就越高。

其它條件不變的情況下，載氣流速越小，形成的物質(zhì)粒子半徑越大，對(duì)光的散射能力越強(qiáng)，相應(yīng)的響應(yīng)信號(hào)越大，更優(yōu)的載氣流速應(yīng)為可接受噪音基礎(chǔ)上并且產(chǎn)生較高響應(yīng)的更低流速。

不同溶劑的揮發(fā)性不同，儀器較長(zhǎng)時(shí)間保存在易揮發(fā)的溶劑中，由于溶劑的揮發(fā)而導(dǎo)致液相的脫氣機(jī)真空不夠而儀器一直顯示未就緒狀態(tài)。遇到這種情況后要先更換揮發(fā)性較低的溶劑（如異丙醇）對(duì)儀器的每個(gè)管路分別Purge 10分鐘以上，然后儀器的噪音會(huì)逐漸降低，軟件也會(huì)由未就緒變成空閑狀態(tài)。然后就可以更換需要的流動(dòng)相進(jìn)行平衡。

這種情況多半是漂移管污染了，需要對(duì)漂移管進(jìn)行清洗。按照儀器說(shuō)明書(shū)的操作用適合的工具拆開(kāi)儀器，用專(zhuān)用的清理刷使用乙醇和清水進(jìn)行清洗。如果使用氨基柱，并將氨基柱用于反相，在水的作用下，氨基會(huì)流失，噪聲就會(huì)比較大，可以通過(guò)提高有機(jī)相比例或更換其他種類(lèi)的色譜柱來(lái)解決。

● 溫度設(shè)置過(guò)低，流動(dòng)相霧化不充分造成。

● 溫度設(shè)置過(guò)高，待測(cè)組分揮發(fā)。

● 漂移管臟，造成低噪音。

● 廢液管沒(méi)入廢液瓶中，廢氣管內(nèi)有液體，廢液管必須在液面以上，在虹吸管形成液封。

● 排氣不暢，或外界抽氣壓力過(guò)大。

遇到這種情況就要考慮同一序列中需要排的樣品數(shù)了。分析原因，可能是流動(dòng)相組成中不同成分的揮發(fā)性不一致，導(dǎo)致運(yùn)行到后面的流動(dòng)相中不同組分的比例發(fā)生變化，出峰情況也就不一樣了；還有可能在運(yùn)行的過(guò)程中樣品顆粒有少量殘留在儀器中沒(méi)有排出而導(dǎo)致后面的樣品面積增大。使用ELSD檢測(cè)時(shí)，可減少同一序列的樣品數(shù)量，檢測(cè)的數(shù)量少了，相對(duì)儀器的負(fù)擔(dān)也會(huì)減少，維護(hù)起來(lái)也方便。

由于選擇ELSD作為檢測(cè)器是用于常量或痕量分析，多數(shù)時(shí)需要對(duì)樣品或預(yù)處理中的萃取液進(jìn)行濃縮，這時(shí)需要考慮溶液中痕量干擾物，如塑料制品中的增塑劑，在多數(shù)萃取時(shí)使用氯仿類(lèi)萃取液時(shí)，會(huì)溶解增塑劑，如果直接上色譜分析，ELSD不會(huì)明顯顯現(xiàn)，一旦進(jìn)行濃縮后，增塑劑濃度變得很大，可以被ELSD檢出。

在ELSD的方法中通常應(yīng)用對(duì)數(shù)相關(guān)的方式進(jìn)行線性回歸，因?yàn)樵贓LSD的檢測(cè)過(guò)程中隨著濃度的增加，信號(hào)響應(yīng)的方差可能會(huì)隨之增大，為了使方差恒定，可以采用濃度和峰面積取對(duì)數(shù)后的線性回歸，并且在實(shí)際供試品含量計(jì)算時(shí)需要帶入線性方程進(jìn)行計(jì)算，在ELSD的方法中不宜采用單點(diǎn)外標(biāo)，至少采用兩點(diǎn)的曲線法進(jìn)行定量計(jì)算。