●如果色譜柱在使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)每個(gè)峰的峰形都出現(xiàn)問(wèn)題，先考察是否有連接問(wèn)題。管線可能太長(zhǎng)或太短，這種情況可能導(dǎo)致滲漏或峰分叉/拖尾。如果管線太長(zhǎng)，密封圈位置不當(dāng)，將發(fā)生滲漏。如果管線推出的距離不夠，將會(huì)產(chǎn)生一段死空間，形成混合腔，導(dǎo)致柱外體積，使峰形變壞。

●如果在樣品分析時(shí)發(fā)現(xiàn)每個(gè)色譜峰都有雙峰出現(xiàn)，尤其在采用單一純物質(zhì)時(shí)，所有的接頭都是正常連接，則可以確定是色譜柱出現(xiàn)問(wèn)題了，一般是柱頭受損或者柱頭固定相污染引起的。

●如果樣品基質(zhì)比較臟，使用一段時(shí)間之后，發(fā)現(xiàn)的峰分叉或拖尾等問(wèn)題，很有可能是保護(hù)柱失效造成的。一般粗略判斷標(biāo)準(zhǔn)，塔板數(shù)、壓力或分離度的改變超過(guò)10%，就需要更換保護(hù)柱了。保護(hù)柱是消耗品，建議直接更換，不需要再生。 

●當(dāng)用溶劑極性強(qiáng)度大的試劑，如純甲醇、純乙腈，純乙醇，而分析體系中以水為主時(shí)，如果樣品進(jìn)樣量大，如定量管為20μL，此時(shí)單一的純物質(zhì)會(huì)出現(xiàn)雙峰，第二峰比di一峰?。看味疾惶粯?span style="margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; font-family: mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, "Helvetica Neue", "PingFang SC", "Hiragino Sans GB", "Microsoft YaHei UI", "Microsoft YaHei", Arial, sans-serif; letter-spacing: 1.6px; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important;">），且拖尾，保留時(shí)間會(huì)提前（相對(duì)進(jìn)樣量少而言），將進(jìn)樣量減少一半以上，峰型將變?yōu)檎?。這是樣品的溶劑與流動(dòng)相極性相差太大，而流動(dòng)相來(lái)不及將其稀釋達(dá)到平衡造成的溶劑效應(yīng)問(wèn)題，該情況的異常建議用流動(dòng)相作為稀釋劑或減少進(jìn)樣量以消除溶劑效應(yīng)。

●目前HPLC分析多為反相色譜，流動(dòng)相多為甲醇、乙腈、水，加各種添加劑以改善分離性能。樣品一般用與流動(dòng)相相溶的溶劑溶解，更佳的溶解方法是用流動(dòng)相溶解。在實(shí)際分析中，有時(shí)候?yàn)榱藰悠返娜芙庑曰蚍€(wěn)定性加入了一點(diǎn)的緩沖液，緩沖液的酸堿性可能會(huì)導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)化，從而產(chǎn)生雙峰現(xiàn)象。此時(shí)需要更換緩沖液，調(diào)整溶劑pH值，或者用流動(dòng)相配置樣品。

●有些樣品由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，存在互變異構(gòu)現(xiàn)象，而這種互變異構(gòu)體無(wú)法分開(kāi)，而是以一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡存在。在色譜分析時(shí)，在一個(gè)特定的條件下（如pH值、流動(dòng)相極性、溫度等），一種物質(zhì)將出現(xiàn)雙峰，雙峰靠的很近，基本齊高，不拖尾，條件稍一變化，尤其pH，雙峰現(xiàn)象將消失。

●體系pH值對(duì)色譜雙峰的影響出現(xiàn)在各個(gè)環(huán)節(jié)上（前面已經(jīng)提到），尤其在緩沖液流動(dòng)相平衡過(guò)程中其影響更為明顯。當(dāng)連續(xù)進(jìn)樣時(shí)，受pH的連續(xù)變化影響會(huì)經(jīng)常遇到這種雙峰的情況。另外，在樣品分析時(shí)，流動(dòng)相的pH盡量遠(yuǎn)離被分析物的等電點(diǎn)，否則也容易引起雙峰的產(chǎn)生。在用離子對(duì)試劑分析時(shí)，選擇不好條件也會(huì)容易引起雙峰的產(chǎn)生。