大家好，高效液相色譜和其它常規(guī)分析儀器一樣，為了能讓高效液相色譜更好的工作、在實(shí)驗(yàn)的時(shí)候得到可靠的數(shù)據(jù)，首先你要保養(yǎng)好它，使它處于一個(gè)健康的待機(jī)狀態(tài)，這樣你使用它進(jìn)行檢測(cè)分析時(shí)就可以比較順利地獲得理想結(jié)果。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣還可以延長(zhǎng)儀器使用壽命。

在日常使用維護(hù)中更重要的主要有三點(diǎn)：脫氣、過(guò)濾和沖洗。這三點(diǎn)屬于更常規(guī)操作要求，同時(shí)也是檢測(cè)分析中必不可少的流程。小編會(huì)分三期為大家講解，今天先帶大家了解下脫氣的具體原因和脫氣的具體方法。

流動(dòng)相里存在氣泡是HPLC系統(tǒng)操作過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題、氣泡會(huì)造成泵輸出的問(wèn)題，也能造成檢測(cè)器的輸出結(jié)果中出現(xiàn)假的色諧峰。大多數(shù)的氣泡問(wèn)題可以在使用流動(dòng)相之前以脫氣的方法來(lái)消除。下面就是小編簡(jiǎn)單總結(jié)了脫氣的主要目的：

1、防止由溶解（在液體中的）氣體量的變動(dòng)引起的檢測(cè)不穩(wěn)程度 。

2、提高保留時(shí)間和色譜峰面積的重現(xiàn)性。

3、防止氣泡引起尖峰。

4、使基線穩(wěn)定，提高信噪比。

5、防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障，示差折射率檢測(cè)器：使折射率變化UV檢測(cè)器（200nm以下）：溶解氧氣有吸收，熒光檢測(cè)器：溶解氧氣有消光作用。

6、減少死體積。

7、防止填料氧化。

只要空氣在流動(dòng)相里保持溶解，氣泡問(wèn)題就很少會(huì)出現(xiàn)。原則上講人工配備的等度洗脫流動(dòng)相般不需要脫氣就可以在實(shí)驗(yàn)中使用，但是被氣體飽和的溶液也只需要非常小的壓力下降就能脫氣。比如當(dāng)流動(dòng)相通過(guò)溶劑人口的在線過(guò)濾器，或者當(dāng)流動(dòng)相進(jìn)人壓力相對(duì)低的檢測(cè)器溶液池時(shí)。因?yàn)檫@個(gè)原因和為了能使一般的HPLC操作具有可靠性，我們強(qiáng)烈建議用于反相色譜的所有溶劑都必須經(jīng)過(guò)脫氣。脫氣對(duì)于正相HPLC來(lái)說(shuō)不會(huì)產(chǎn)生很多問(wèn)題，所以使用正相色譜時(shí)脫氣是可選的。需要除去的溶解在流動(dòng)相里的氣體量根據(jù)HPLC泵的設(shè)計(jì)不同而不同，一些泵能夠承受大量溶解在流動(dòng)相里的氣體而另外些泵則需要徹底脫氣才能達(dá)到可靠的操作效果。

1.抽真空脫氣法：此法可使用真空泵，降壓至0.05～0.07MPa即可除去溶解的氣體，用真空脫氣10-15分鐘可以除去60%-70%溶解在流動(dòng)相的氣體。但是由于真空脫氣會(huì)使混合溶劑組成發(fā)生變化，從而影響到實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性，因此多用于單溶劑體系的簡(jiǎn)單分析。

2.氦氣噴洗脫氣法：氦氣噴洗是除去流動(dòng)相里的氣體更有效的技術(shù)，主要是利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性，在0.1MPa壓力下，以約60mL/min流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器中10～15min，可以很有效地從流動(dòng)相中排除溶解的空氣，能排除接近80%-90%溶解的氣體。采用一個(gè)高效分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動(dòng)相中將等體積的幾乎全部氣體排除。

3.在線脫氣法：在線脫氣主要優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，低故障，并非常有效。

4.加熱回流法：此法的脫氣效果較好。但是還是有一些不足，那就是在操作時(shí)要特別注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑會(huì)丟失，混合流動(dòng)相的比例會(huì)有變化。

5.超聲波脫氣法：實(shí)驗(yàn)室更普遍的脫氣方法，主要操作就是將欲脫氣的流動(dòng)相置于超聲波清洗器中，用超聲波震蕩時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，避免溫度升高導(dǎo)致易揮發(fā)性成分的丟失，一般在5min之內(nèi)。但是相對(duì)于其他脫氣方法，優(yōu)點(diǎn)是容易操作，時(shí)間短。不足之處則是此法的脫氣效果相對(duì)較差。